Эрин Трэн, научный сотрудник, который работает в Лаборатории Раздела Биологии/Биофизики Клетки Национального Онкологического института NIH, представит исследование на 61-м Годовом собрании Биофизического Общества в Новом Орлеане, Луизиана, которая бежит с 11-15 февраля 2017. Трэн использовала криоэлектронную микроскопию (КРИОИХ) методы, чтобы определить, включают ли, имеющее форму шипа ХА белки в их родной среде себя в вирусной мембране, подражая тому, что могло бы видеть тело, когда это выставлено вирусам гриппа. Работа – часть продолжающегося сотрудничества между лабораториями Питера Пэлезе и Флориэна Крэммера в Горе Синай и Sriram Subramaniam в NIH.
«В нашем случае этот процесс начинается с вирусов, временно отстраненных в жидкости», сказал Трэн. «Несколько снижений вирусной приостановки – содержащий тысячи вирусов – помещены на крошечную, круглую медную сетку. Дополнительная жидкость запачкана далеко с фильтровальной бумагой, и сетка немедленно погружена в лужицу жидкого этана, который сохраняется при температуре приблизительно-180 ° C. Это замораживает вирусы в очень тонком слое подобного стакану льда и позволяет нам изображению их в их родном государстве».
После того, как замороженный, вирусы – изображенное использование электронного микроскопа.«Мы получаем трехмерное изображение, используя процедуру, которая включает сбор серии изображений вируса при различных ориентациях относительно электронного луча инцидента», сказала она. «ХА изображения белка шипа от единственных вирусов ‘шумные’, но насчитывая изображения от многократных вирусов мы можем получить более точное представление формы ХА поверхностного белка».
Tran и коллеги были удивлены гибкостью и упругостью, показанной гриппом ХА белок. Когда белки делают из двух различных напряжений ДНК, и следовательно называют фантастические, команда нашла драматический поворот.«Главная часть белка возмещена от порции стебля почти 60 градусами, все же вирусы, которые выражают, они фантастические ИМЕЮТ, все еще функциональны, и фантастический белок все еще в состоянии связать антитела, которые предназначаются или для головы или для основы белка», сказал Трэн». [Работа] показывает, что криоэлектронная томография может использоваться в качестве эффективного способа характеризовать кандидатов вакцины против гриппа в родном контексте."Их следующая цель состоит в том, чтобы узнать, представительные ли структурные изменения, они видят в этом конкретном фантастическом ХА белок, для более широкого набора фантастических, ИМЕЕТ.
«В целом мы интересуемся использованием криоэлектронной микроскопии и томографии, чтобы визуализировать вирусное использование механизмов, чтобы заразить клетки», сказал Трэн. «Мы исследуем множество окутанных вирусов, включая ВИЧ и Эболу, чтобы лучше понять механизмы, которыми может быть заблокирован их вход в клетки».