Мутация BRAF встречается от 40% до 50% метастазирующих меланом (рака кожи), ускоряя рост опухоли. Пациентов с метастазирующими меланомами, у которых обнаружена мутация BRAF, можно лечить ингибитором, который действует специфически против мутации BRAF (ингибитор BRAF в сочетании с ингибитором MEK). Первоначально лечение чрезвычайно эффективно, но максимум через 11 месяцев пациент становится к нему невосприимчивым. Верена Пауличке из отделения дерматологии MedUni Vienna определила некоторые механизмы, которые могут вызвать эту резистентность. Это вполне может привести к новым концепциям лечения и прогнозным биомаркерам, а также к лучшему общему пониманию патомеханизмов, ведущих к заболеванию.
Ген BRAF человека продуцирует белок (B-Raf), который является важным компонентом сигнального пути RAS-RAF, тем самым играя роль в нормальном росте и выживании клеток. Однако мутированные формы могут вызвать чрезмерную активность этого сигнального пути. Это, в свою очередь, приводит к неконтролируемому росту клеток и раку.
Цель исследователей из отделения дерматологии MedUni Vienna – понять эти механизмы резистентности и, на следующем этапе, задержать или даже предотвратить развитие резистентности. С помощью технологии протеомики теперь стало возможным получить первое представление о лежащих в основе механизмов. Ключевая технология масс-спектрометрии ("протеомика дробовика"), в частности, позволяет идентифицировать и охарактеризовать белки из клеток человека. Белки ферментативно перевариваются, а образующиеся пептиды отделяются.
"Мы смогли показать, что устойчивость к ингибитору BRAF связана с повышенной экспрессией лиосомного компартмента (примечание: сферические везикулярные клеточные органеллы), с повышенным связыванием клеток и с морфологическими изменениями в клетках, от сферических до веретеновидных," объясняет Пауличке. Основываясь на этом профиле устойчивости, затем можно было продемонстрировать эффективность производного резерватрола M8, природного полифенола, содержащегося в основном в винограде. "В качестве клеточных моделей мы использовали клетки с индуцированной резистентностью и первичные клеточные системы, в которых были идентифицированы похожие сигнатуры. Затем стало возможным коррелировать экспрессию белков (которые были активированы в резистентных клетках) с плохой выживаемостью без прогрессирования заболевания, используя срезы тканей или сыворотки пациентов с меланомой," говорит исследователь MedUni Vienna.
"Новые технологии, такие как «протеомика дробовика», позволили нам провести механистический анализ инновационных терапевтических подходов. Используя эти стратегии, стало возможным получить новое представление о механизме, лежащем в основе устойчивости к ингибированию BRAF, и на основе этого мы могли бы разработать новые рациональные терапевтические концепции и прогностические и фармакодинамические биомаркеры," говорит Пауличке.